液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
正常情況下，液相色譜儀色譜柱至少可以使用3～6個月，能完成數(shù)百次分離。但若操作不慎，將很容易損壞色譜柱而不能使用。因此為了保持柱效、柱容量和滲透性，必須對色譜柱進行仔細(xì)保養(yǎng)。
一、色譜柱的保護：
1、流動相和樣液都需用0.45um孔徑的濾膜過濾。
2、加3～5cm保護柱。
3、進樣閥進樣。
4、用純甲醇保存色譜柱，防止細(xì)菌生長。
5、防止過酸或過堿。
6、防止振動和逆向流動。
7、對硅膠基鍵合相，水溶液流動相的PH值不得超出2～8.5的范圍，使用溫度不宜過高。
8、色譜柱在酸性或堿性條件下使用后，應(yīng)依次用水和甲醇清洗。對暫時不用而需要較長時間保存的色譜柱，要用純甲醇清洗。
9、色譜柱兩端用金屬螺帽封閉，保存在干凈的有機溶劑中。
二、色譜柱的再生：
一般情況下，硅膠和ODS等化學(xué)鍵合固定相再生是困難的。有時采用下述方法可能提高柱效。
1、由于雜質(zhì)微粒等因素，使色譜柱上端固定相變色，柱效下降。這時，可仔細(xì)地將變色部分除去約3mm左右，再補充新的固定相。
2、當(dāng)色譜柱吸附未被洗脫的成分時，柱效將明顯下降，可選擇合適的溶劑洗凈。
3、當(dāng)采用梯度洗脫時，色譜柱在重復(fù)使用前，用泵把幾倍于柱體積的起始溶劑壓經(jīng)色譜柱，以重新建立起始的平衡來得到再生。
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更新時間：2020-03-19 
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